In fluoreszensmikroskoop is in soarte optyske mikroskoop dy't in ljochtboarne mei hege yntinsiteit brûkt om it eksimplaar te ferljochtsjen en fluorochromen yn 'e stekproef te stimulearjen. De ferljochting fan it eksimplaar wurdt normaal dien mei in ljochtboarne dy't ultraviolet ljocht útstjit. Se wurde in protte brûkt yn biologyske, medyske en yndustriële fjilden.
Hoe wurket in fluoreszensmikroskoop?
In fluoreszensmikroskoop brûkt in kwik- of xenonlampe om ultraviolet ljocht te produsearjen. It ljocht komt yn 'e mikroskoop en treft in dichroyske spegel - in spegel dy't ien berik fan golflingten wjerspegelet en in oar berik troch kin. De dichroyske spegel wjerspegelet it ultraviolet ljocht oant it eksimplaar. Guon eksimplaren fluoresearje natuerlik ûnder ultraviolet ljocht, om't se fluorescent stoffen lykas chlorofyl befetsje. As it te besjen eksimplaar net natuerlik fluoresceart, kin it bevlekt wurde mei fluorescent kleurstoffen neamd fluorochromen.
Wat bestiet in fluorescinsjemikroskoop?
1. Ljocht boarne
De meast foarkommende ljochtboarnen binne kwik, xenon, en LED's. Mercurius jout de bêste kwaliteit fan ljocht foar fluorescence mikroskoop. LED's wurde populêrder om't se minder djoer binne as oare boarnen en se konsumearje minder macht.
| Merkurius Lamp | Xenon lampe | LED | |
| Golflingte fan it útstjoerd ljocht | 350-370 nm | 400 nm ~ 450 nm | 400-700 nm |
| Lifetime (oeren) | 200-300 | 400-600 | 10000 |
| Foardiel | 1. Ljocht mei hege yntinsiteit, de meast foarkommende ljochtboarnen. 2. It stjoert sterke ultraviolet en blau-fiolet út om alle soarten fluorofoaren te stimulearjen. 3. Heldere en kleurrike ôfbyldings. | 1. De spektrale yntinsiteit is stabyl. 2. Sterke spektrale yntinsiteit yn it ynfraread en mid-infraread. | 1. Maklik te ferfangen. 2. Gjin needsaak om te waarmjen. 3. Kin wurde oerskeakele op en út direkt. 4. Control ljocht boarne yntinsiteit. |
| Neidiel | 1. In koarte libben. 2. Lange opwaarming tiid. | 1. Spesjale lege spanning DC power box is nedich foar oerstallige waarmte. 2. djoerder as Mercury Lamp | 1. UV ljocht is swakker as kwik lamp. 2.Elke golflingte fan ljocht fereasket in aparte LED troch de smelle bânbreedtes dy't se útstjitte. |
Mercury Fluorescent Taheaksel
LED Fluorescent Taheaksel
2. Excitation Filter
It excitaasjefilter is essensjeel foar de wurking fan in fluoreszensmikroskoop. It trochgiet it ljocht fan in koartere golflingte, dat de fluorescent kleurstof koe absorbearje. Ek blokkeart it de oare boarnen fan spannend ljocht.
Eksitaasjefilter (B,G,U,V)
3. Dichroic Mirror
De dichroyske spegel is in soarte fan optysk filter dat ljocht reflektearret op bepaalde golflingten wylst oaren trochjaan. It wurdt brûkt yn fluoreszensmikroskopen om de excitaasje- en emisjegolflingten te skieden.
4. Emission Filter
It emisjefilter trochgiet allinich de golflingten útstjoerd troch de fluorofoor en blokkearret alle net winske ljocht bûten dizze band - benammen de excitaasjewellenlangen.
5. Fluorescent kleurstoffen
Fluorescent kleurstoffen binne organyske ferbiningen dy't besitte in eigenskip fan fluorescence, wêrmei se kinne foarmje in fluorescent byld troch emitting sterk kontrast sichtber grien ljocht nei't wurden optein troch it tige ferljochte ultraviolet ljocht. Faak brûkte fluorescent kleurstoffen binne; DAPI (49,6-diamidino-2-phenylindole), acridine oranje, auramine-rhodamine, Alexa Fluors, of DyLight 488.
Hoefolle soarten fluoreszensmikroskopen?
1. Upright Epifluorescence Mikroskoop:
It is it meast foarkommende type fluoreszensmikroskoop. De opwekking fan 'e fluorofoor en deteksje fan' e fluoreszinsje wurde dien fia itselde ljochtpaad (dus troch it objektyf). De mearderheid fan fluoreszensmikroskopen, fral dy brûkt yn 'e libbenswittenskippen, binne fan it epifluoreszensûntwerp.
BS-2081F Undersyk Fluorescent Biologyske mikroskoop
2. Konfokale fluoreszensmikroskoop:
Konfokale fluoreszensmikroskoop: Dit soarte fluoreszensmikroskoop kombineart laserscannen mei fluorescent ferljochting om in ôfbylding te produsearjen. It kin brûkt wurde yn in breed skala oan tapassingen, lykas it bestudearjen fan sellen en weefsels, it opspoaren fan aaiwiten en oare stoffen binnen sellen, en it mjitten fan de dikte fan materialen.
BS-2081F Undersyk Fluorescent Biologyske mikroskoop
3. Inverted fluorescence mikroskoop
De ljochtboarne en de kondensor fan dit soarte fan mikroskoop lizze oan 'e boppekant, nei ûnderen. De ferljochtingshoek moat op 90 graden wêze mei respekt foar it oerflak fan it ûndersochte eksimplaar.
BS-2095F Inverted fluorescent mikroskoop
Wat binne de foardielen en neidielen fan fluoreszensmikroskopen?
Foardielen:
- Stelt observaasje fan sellen yn libbene organismen mooglik sûnder se te beskeadigjen
- Biedt ôfbyldings mei hege resolúsje mei krekte kleuren
- Stelt de stúdzje fan live prosessen yn sellen mooglik
- Wurdt brûkt om ferskate soarten molekulen yn sellen te identifisearjen, lykas aaiwiten of nukleïnesoeren.
Neidielen:
-It lit allinnich de observaasje fan spesifike struktueren binnen in sel tagged mei de fluorescent kleurstof.
-De photobleaching fanwege de elektron excitation tidens it proses fan fluorescence kin beynfloedzje reaktive molekulen fan de fluorescent kleurstoffen. As gefolch kinne de reaktive kleurstoffen har gemyske eigenskip fan fluorescinsje-emisje-yntensiteit ferlieze.
-De sellen binne gefoelich foar it phototoxic effekt nei kleuring mei fluorescent kleurstoffen, as de fluorophore molekulen absorb de hege enerzjy fotonen út de koarte-golflingte ljocht.
Wat binne de tapassingen fan in fluoreszensmikroskoop?
Fluorescensmikroskopen wurde in protte brûkt yn ferskate fjilden fan ûndersyk en tapassing, ynklusyf biogemy, selbiology, mikrobiology, immunology en medisinen.
1. Op it mêd fan biology makket it fluoreszensmikroskoop genôch en detaillearre identifikaasje fan sellulêre en submikroskopyske sellulêre komponinten en aktiviteiten mei help fan fluorescent kleurstoflabeling.
2. Op it medyske fjild kin it fluoreszensmikroskoop fluorescent reagents brûke om de oanwêzigens en ferdieling fan baktearjes en firussen te ûntdekken, of om te helpen by it markearjen fan sjirurgyske doelen om sjirurgy te fasilitearjen.
3. Op it mêd fan mineralogy wurdt de fluoreszinsjemikroskoop faak brûkt om stoffen te bestudearjen mei spontane fluoreszinsje-eigenskippen, lykas asfalt, petroleum, stienkoal, grafeenoksyde en oare mineralen.
4. Yn materiaalwittenskip kin de fluoreszensmikroskoop brûkt wurde yn 'e tekstylyndustry of de papieryndustry om fiber-basearre materialen te analysearjen.
Post tiid: Mar-14-2023